DNA电泳试剂
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成分及终浓度 |
配制100mL溶液用量 |
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2mol/L Tris 1mol/L 乙酸 100 mmol/L EDTA ddH2O |
24.2g 5.71mL的冰乙酸（17.4 mol/L） 3.72gNa2EDTA·2H2O 补足100mL |
50×Tris-乙酸（TAE，pH=8.5）缓冲液
注意事项
1. 准确称量各物质，确保缓冲液处于最佳状态。
2. 不要用Tris缓冲液来配制2mol/L Tris，因为常见的Tris缓冲液用了HCl调节pH，成了Tris-HCl缓冲液，使用纯Tris，配制Tris-乙酸缓冲液。
蛋白Western Blotting试剂
30%丙烯酰胺（29:1）
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丙烯酰胺acrylamide 甲叉丙烯酰胺 N’N’-methylene acrylamide |
87.6 g 2.4 g |
去离子水定容至300 ml, 滤纸过滤避光保存在4℃，保质期1个月。
注：完全避光4℃保存，2年内使用也没什么问题
10% SDS
10g SDS
90ml 去离子水 搅拌溶解
定容至100ml
1.5M Tis-HCL，PH8.8
27.23g Tris-base
80 ml 去离子水
用6N的HCL调节PH值至8.8
定容至150ml，4℃或室温保存
1M Tis-HCL，PH6.8
12g Tris-base
60ml 去离子水
用6N的HCL调节PH值至6.8
定容至100ml，4℃或室温保存
10% 过硫酸铵（APS）
100mg APS
溶于1ml去离子水中
建议新鲜配制，但一般配制好的溶液4℃保存2周没问题
注意事项
1.PMSF剧毒，严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤，吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。为了安全和健康，穿实验服并戴一次性手套操作。一旦眼睛或皮肤接触立即用大量水冲洗之。凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。
2. PMSF在水溶液中不稳定。
1％溴酚蓝（bromophenol blue）
加1g溴酚蓝于100ml ddH2O中，搅拌或涡旋混合直到完全溶解。
5X上样缓冲液
Takara公司上的5×SDS－PAGE Loading Buffer配方：
组分浓度：
250 mmol/L Tris-HCl (pH 6.8)
10% (W/V) SDS （电泳级）
0.5% (W/V) 溴酚蓝（BPB）
50% (V/V) 甘油
5-10% (W/V) β-巯基乙醇（2-ME）（使用前加入）
配制量 5 ml
配制方法
1．称量下列试剂置于10ml 塑料离心管中。
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1 M Tris-HCl (pH 6.8) SDS （电泳级） 溴酚蓝（BPB） 甘油 |
1.25 ml 0.5 g 25 mg 2.5 ml |
2．加去离子水溶解后定容至5 ml，室温保存。
3．使用前加入10% 2-ME（二巯基乙醇），如50 μl的2-ME加到450μl上样液中。
4．加入2-ME的Loading Buffer可在室温下保存一个月左右。
10×Tris-甘氨酸缓冲液
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成分 |
配制100mL溶液用量1 L |
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Tris 甘氨酸 SDS |
30.2 g 188 g 10g |
使用时稀释10倍使用
10×转膜缓冲液（10×running buffer） (定容至1L)
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Tris 甘氨酸 |
30.3g 144g |
不调pH
使用时稀释10倍使用
1×转膜工作液 (定容至1L，4℃保存)（现配现用）
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10×转膜缓冲液 无水甲醇 ddH2O |
100ml 200ml 700ml |
10×TBS 缓冲液（1L）
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Tris-HCl NaCl |
24.3g 88g |
用浓盐酸约14ml调节pH值至约7.4（pH试纸检测即可）
1×TBST
TBS+Tween-20 0.1%（1ml for 1L）
培养基类
LB培养基
将下列组分溶解在0.9L ddH2O中：
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蛋白胨Tryptone |
10g |
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酵母提取物Yeast Extract |
5g |
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氯化钠Nacl |
10g |
2×YT培养基
将下列组分溶解在0.9L ddH2O中：
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蛋白胨Tryptone |
16g |
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酵母提取物Yeast Extract |
10g |
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氯化钠Nacl |
5g |
注意事项
如需用4M NaOH（约0.5mL）调整pH至7.0，再补足水至1L。分装于锥形瓶并用封口膜进行封口，121℃灭菌20min，4℃保存。
细菌LB固体培养基
在LB液体培养基的基础上，加入1.5g/100ml琼脂粉Agar， 121℃灭菌20min，降温到60℃，稍微烫手，加入抗生素迅速倒平板，每个10cm平板大约倒10ml，4℃保存三个月。
抗生素类
氨苄青霉素（Amp）（100mg/mL）
溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的ddH2O中，定容至10mL。分装成小份于-20℃贮存。常以常50ug/mL终浓度添加于生长培养基。
卡那霉素（kan）（10mg/mL）
溶解100mg卡那霉素于足量的ddH2O中，定容至10mL。分装成小份于-20℃贮存。常以50ug/mL终浓度添加于生长培养基。
注意事项
1.以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理，用ddH2O配的用0.45或0.22um无菌过滤器过滤除菌。
2.所有抗生素溶液均应放于不透光的容器保存，也可用锡箔纸包裹。
3.抗生素配制出以后4℃可保存3个月，-20℃可保存一年。
核酸蛋白提取类
RIPA裂解液
成分及终浓度 配制500mL溶液用量
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50mM Tris（PH7.5） |
3.02g |
ddH2O至 500ml，调pH值至7.5。混匀后4℃保存，长期保存于-20℃。使用时，加入蛋白酶抑制剂cooktail。
5M NaCl
称取29.22g氯化钠于100mL烧杯中，加入约80mL ddH2O加热搅拌溶解，定容至100mL，高温高压灭菌后使用，4℃保存。
0.5M EDTA(pH8.0)溶液
在80mL ddH2O中加入18.612g EDTA-Na2·2H2O，在磁力搅拌器上剧烈搅拌，用NaOH调节溶液的pH值至8.0（约需2.2g NaOH颗粒）然后定容至100mL，分装后高温高压灭菌备用。室温长期保存。
注意事项
EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0,才能完全溶解。而且配制时最好使用EDTA钠盐（其较易溶于水，而EDTA较难溶于水，易溶于有机溶剂）。
10mg/ml牛血清蛋白(BSA)
加100mg BSA于9.5ml ddH2O中，定容到10ml，分装贮存于-20℃。
1M二硫苏糖醇（DTT）
在DTT 5g的原装瓶中加32.4ml ddH2O，分成贮存于-20℃。
1M HEPES
将23.8gHEPES溶于约90ml的ddH2O中，用NaOH调pH（6.8-8.2），定容至100ml。
1M HCl
加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的ddH2O中。
25mg/ml IPTG
溶解250mg的IPTG于10ml ddH2O中，分装贮存于-20℃。
1M MgCl2
溶解20.3g MgCl2•6H2O于ddH2O中，定容到100ml。
100mM PMSF
溶解174mg的PMSF（苯甲基磺酰氟）于足量的异丙醇中，定容到10ml，分装避光贮存于-20℃。