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Primer Premier 5.0 是一种用来帮助研究人员设计最适合引物的应用软件利用它的高级引物搜索引物数据库巢式引物设计引物编辑和分析等功能可以设计出有高效扩增能力的理想引物也可以设计出用于扩增长达50kb以上的PCR产物的引物序列。

前些时间有朋友问我怎样用Primer 5.0来设计引物，ok，来看看吧！

下载Primer 5.0链接：https://pan.baidu.com/s/1TQtzfx0qYgHceftCDMQxyQ 提取码：b1h5 

安装Primer 5.0

启动 Primer Premier v5.0　与 Primer Keygen(注册机），在 Primer Premier v5.0 程序界面的 “GeneTank” 处点击 “Active Product” 按钮，将ID号填到注册机上，get到激活码，并在Primer 5.0里输入注册机“generate”的激活码，提示注册成功即可！

引物设计

先准备好你的目的序列。打开Primer5.0，依次打开File→New→DNA sequence。将目的序列输入到文本框中

点击ok完成导入，点击Primer

会出现这样的界面，接着点Search

然后里面会有很多参数

看个人需要了，首先可以设计PCR引物、测序引物和探针引物。另外可以调节引物的长度、引物的范围、目的片端的长度，如果都没有什么要求的会直接就自动默认就好了。

一下子就找到了好多

选择一条合适的导出来就好了，简单吧！

当然不要忘记了引物设计的黄金准则哦（引物设计不合理，你中招了吗？）

另外，选择的引物最好进行Blast分析一下，可以知道它是否会比对到其他基因上的同源序列。比如上NCBI，找到Blast界面

翻下一点有一个primer blast

将上下游引物序列输入

注意物种及参考序列就好了

比对分析到没有交叉到其他基因的同源序列就可以了

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By 进哥哥Tags:

70 Replies to “Primer Premier 5.0 安装使用”

  1. 王老师您好，我点开注册及后，没有显示激活码，要怎么处理呢？

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  4. 你好，我想问一下那个注册机的程序为什么无法generate激活码？

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  9. 进哥，链接失效了，能再发饿个不，或者方便的话加个vx发一下，谢谢啦

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  11. 进哥，你好。就是我想请问一下，我的Primer界面打开，但是没有跳出来 激活产品 这一步 ，这是怎么回事呀

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        1. 进哥，我的也是这个问题，第一遍都注册成功了，然后想换个盘装，就删掉了，再次打开就是这样了，Primer 界面打开没有弹出激活产品这一步，该怎么搞啊？

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      2. 进哥，我安装也出现了这个问题，打开Primer界面没有激活产品这个弹出来，我是第二次安装，第一次成功了的，不知道为啥就到激活产品这一步就没下文了，重新安了好几次，都是这样，能给我指点指点吗？

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        1. 额，可能软件兼容性的问题，毕竟老古董了，实在不行就用NCBI primer blast设计吧，B站我发了个教程：https://www.bilibili.com/video/BV1i8411m7ia/

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  12. 进哥您好，我是生信小白，我想请教一下，primer premier5.0适用于设计特异性分子探针吗？设计的流程是否和引物设计是一样的？谢谢进哥，永远幸福！

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  15. 您好，我这边是第一次打开成功并且激活之后，再次打开的时候是只能从压缩包里面打开，但是这个时候就没办法出现第一打开成功的界面，不知道是不是我电脑的原因？

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  17. 您好，为什么我安装的时候打不开软件或者是打开软件后点activate激活按钮就会闪退呀

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    1. 您好 这个软件在win10/11上不太兼容，偶尔使用时会闪退，一般也还好，如果一直有问题可以加微信远程看看

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      1. 你好，我是win11系统，一直闪退，可以麻烦你指导一下吗

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  20. 您好，primer premier5的引物评判标准是什么？Hairpin、Dimer、False Priming、Cross Dimer，如若Found的话△G值在多少对引物影响不大。

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    1. 您好，引物需要考虑的包括你上面提到的 当然还有GC%等 其实也不用考虑那么多，软件会自动根据这些参数计算rank，尽量选前面的 rank>80 基本没问题

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      2. 问一下用同源重组的方法敲除基因设计同源臂有什么需要注意的吗

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  21. 我激活成功啦，原谅我的理解能力实在太差（哭笑不得），十分感谢大佬！

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  23. 你好！我要说的问题如下
    问题一：为什么在Microsoft 网页上总是显示“已阻止不安全下载”，
    问题二：在百度网盘下载完成后，解压后只能在文档中打开，不能通过软件本身打开。会显示：文档需要的文件已经丢失，请重新下在

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    1. 你好，这个问题应该是被杀毒软件隔离了，我用360浏览器可以直接下载打开，你说的问题我这边也没有遇到

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      1. 好的，谢谢您王老师，问题已经解决了，您在网页开头给的链接进去提取不到，后面我在您给别人的恢复中看到的链接能提取成功。

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  25. 博主，您好！请问您有Mac版的primer设计软件吗？我也是在读博士，这个软件我一直找不到Mac版的

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  27. 你还，我的结果提取不出来，总是出现错误提示。是因为win10不兼容的原因吗？

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          1. 我是Primer Keygen(注册机）验证码提取不出来，跟着您的这条步骤到了复制这一步，但是我选中不了您这条回复图片标注红框的位置，也具体不知道是不是该复制这个地方及怎么复制，谢谢

        1. 你好，是指没法激活吗？错误信息是什么？软件本身是免安装的。此外由于软件是很经典的原先在XP系统上的，win10可能有一点点不兼容，应该也不影响使用

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          1. 打开报错“ERROR:MSG 0x0073c35f[CAT 7/3 std 50012]……”巴拉巴拉，没办法激活，只能demo模式无法正常使用。

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