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导读

据统计,全球每年用于科研的实验动物约10亿只,中国占到2000万只,尽管它们与人类同为自然赋予的生命形态,然而却遭受着很多违背伦理的虐待,如滥用、非安乐死处理等。近年来,虽然我国逐步颁布了一批相应的法律法规,但是多数工作者仍对其规定仍感到陌生,有的人甚至闻所未闻。并且我们经常存在:投稿的Paper因不符合实验动物福利与伦理学要求而被撤稿,如往期文章提到的险被撤稿的Nature论文。为此,小编觉得,普及实验动物福利和伦理学刻不容缓。下面就一起学习:如何在实验研究中善待这些可爱的动物们。

一、中国实验动物福利与伦理学的进步

自1966年,美国制定《实验室动物福利法》,“动物福利”、“动物伦理”等字样进入人们的视野,在国外包括美国、欧盟、澳大利亚等100多个国家相继建立了完善的法律体系,并执法严格。

但在我国仍然连续发生虐待动物的事件,如活熊取胆、活猪注水、酷刑屠狗等等。这些事件也引起社会的广泛关注,提醒在我国该密切关注动物福利了。

可喜的是2006年中国发布《关于善待实验动物的指导性意见》的通知,包括在中国实行“3R原则”!“3R原则”反映了实验动物科学由技术上的严格要求转向人道主义的管理。

2016年又发布了《中国首个关于实验动物福利与伦理的国家标准草案》公开征求意见,为此引起了世界很大轰动,同年4月Science网站也进行相关报道,表明中国科学家们希望该标准有助于提高动物福利水平和在中国开展国际合作研究的前景[1]。

二、保障实验动物福利与伦理的意义

1. 道德层面  动物福利理念建立在人类文明道德伦理基础上,善待动物是人类文明道德的需要,也是人与大自然和谐发展的需要。

2. 科学价值  保障动物福利使动物处于正常生活状态下,才能得到准确、可靠的实验数据,与国际接轨。如:大动物实验前必须驯化,让其主动配合采集血样和生理指标测定,而不能采用麻醉或者强扭的方式。

3. 经济价值  对于经济动物实施动物福利,有利于获得优质、高产的动物产品,如牛在舒适环境下产奶量增加,鸡在优良饲养条件下产蛋数增加,同时也是国际贸易的需求。

三、动物福利与伦理的几个主要方面

1、五项权利或自由;2、日常饲养和管理;3、动物运输;4、实验操作(实验设计实行3R原则,仁慈终点,安乐死)等几部分[2-3]

1. 五项权利或自由the five freedoms

为了实验动物保障动物处于舒适、健康、快乐等自然生活状态,首先要明确实验动物享受五项自由或者权利。所有的规范应在此福利上实施。包括:

1)免于饥渴的自由—保障有新鲜的饮水和食物,以维持健康和活力

2)免于不适的自由—提供舒适的栖息环境

3)免于痛苦、伤害和疾病的自由—享有预防和快速的诊治

4)表达主要天性的自由—提供足够的空间、适当的设施和同类的社交伙伴

5)免于恐惧和焦虑的自由—保障良好的条件和处置,不造成动物的精神压抑和痛苦

2. 日常饲养和管理

首先保证为实验动物提供清洁、舒适的生活环境,内环境指标不得低于国家标准;并且合理饲养动物,从业人员不得戏弄或虐待实验动物。如在抓取动物时,应方法得当,态度温和;并应定期对动物进行观察,若发现异常及时处理等。

3. 动物运输

尽可能减少动物的运输,如需运输,应尽可能减少动物的应激反应,保证运输前后的饲养环境及条件应尽可能的一致,运输后,不应立即进行动物实验操作等。

4 . 实验操作(实验设计实行3R原则,仁慈终点,安乐死等)

1) 实验设计实行3R原则( 3R principles)

“3R原则”观念最早是在1959年由Russell及Burch所提倡的,指实验动物实验应该遵循的原则,以保障实验动物的基本福利及实验数据的科学性,包括实验动物的替代、减少和优化原则。具体如下:

① 替代(Replacement):尽量不使用动物而采用其它方法达到与动物实验相同的目的。如:

  • 低级动物代替高级动物、小动物代替大动物

  • 用组织学实验代替整体动物实验

  • 用分子生物学方法替代动物实验

  • 人工合成材料替代动物实验

  • 利用数学及计算机模拟动物各种生理反应替代动物实验

  • 用物理、化学和信息技术方法代替实验动物的使用

② 减少(Reduction):减少实验用的动物数目,同时保证数据信息的数量与精确度。使实验结果在能说明问题的前提下,尽可能地减少实验中所用动物的数量。

如下表为减少实验动物数量的若干建议:

③ 优化(Refinement):对必须使用的实验动物,应尽量减低非人道方法的使用频率或危害程度。

这是3Rs中最常用之措施。如改善动物设施、饲养管理和实验条件,精选实验动物、技术路线和实验手段,优化实验操作技术,尽量减少实验过程对动物机体的损伤,减轻动物遭受的痛苦和应激反应,使动物实验得出科学的结果。

2) 仁慈终点humane endpoint

动物实验过程中,在得知实验结果时,及时选择动物表现疼痛和痛苦的较早阶段为实验的终点,以为避免对动物产生一些无法忍受之疼痛及焦虑。如动物出现以下行为时要考虑中止实验:

  • 行动能力出现障碍,致使动物无法获取食物及饮水

  • 体重失重过多或消瘦

  • 身体或精神感官反应迟顿

  • 呼吸因难

  • 无法保持站立姿态

具体实验操作中可参考下表[4]

3) 安死术euthanasia

人道地终止动物生命的方法,最大限度地减少或消除动物的惊恐和痛苦,使动物安静地和快速地死亡。安死术具体操作细节可参考往期文章链接

为了保障实验动物福利与伦理学,不仅仅在于明确以上基本实验动物福利和伦理,根据实验动物有关法律规定,对于从事实验动物研究的人员,需项目负责人向伦理委员会申请福利伦理审查,应获得伦理委员会的批准后方可开始动物实验,并接受日常的监督检查。

为了人类的健康,实验动物作为人类的受难替代者,遭受着各种难言的苦楚,为此我们必须尊重实验动物,重视其福利,如尊重她的五项权利、给予舒适的环境、可口的食物、实验操作最小化痛苦等。

最后,真心希望大家看了这篇文章后,能够认真地重新审视自己的实验,如:做好充分的实验设计,熟练掌握好各项实验技巧后再进行操作等,这样也有利用我们得到更科学的实验数据。

相关参考资料链接(可自行下载):

1.http://www.sciencemag.org/news/2016/03/china-finally-setting-guidelines-treating-lab-animals   Science:中国制定了实验动物福利伦理审查指南

2.http://www.most.gov.cn/fggw/zfwj/zfwj2006/200609/t20060930_54389.htm 2006年关于发布《关于善待实验动物的指导性意见》的通知

3.http://www.lascn.net/UploadFiles/2016/4/201604111021491862.pdf   2016年《实验动物福利伦理审查指南》征求意见稿

4.http://grants.nih.gov/grants/olaw/GuideBook.pdf  (Institutional Animal Care and UseCommittee Guidebook)

 

精彩内容列表(持续更新)

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1.1 常见大小鼠品系

1.2 如何进行小鼠科学地饲养

1.3 小鼠的一生及繁育过程

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1.5 小鼠隔离与净化

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1.7 尾静脉注射实验技巧

1.8 大鼠信息介绍

 

2. 模式动物系列(二)基因编辑鼠

(一)基因编辑鼠的构建流程

2.1  基因编辑鼠的构建

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2.3  sgRNA表达载体构建

2.4  显微注射操作步骤及要点

2.5  小鼠培育及繁殖过程

2.6  小鼠基因型鉴定

2.7  小鼠保种方式(精子、胚胎冻存)

2.8  小鼠体外受精介绍

 

(二)基因编辑鼠的发展与分类

2.9 基因编辑小鼠的发展过程

3.0 如何选择正确的基因编辑小鼠

3.01 基因敲除(KO)小鼠的原理、构建、鉴定与应用

3.02 基因敲入(KI)小鼠的原理、构建、鉴定与应用

 

3. 模式动物系列(三)疾病动物模型

(一)疾病动物模型概况

3.1 疾病动物模型基本介绍

3.2 免疫缺陷动物

3.3 人源化动物

3.4 肿瘤动物模型介绍

3.5 肿瘤模型之生长、转移及复发模型

3.6 免疫疗法相关肿瘤模型介绍

 

(二)肿瘤动物模型的构建

3.7 如何正确地选择肿瘤动物模型?

3.8 移植性肿瘤模型的建立之皮下荷瘤

 

4.  实践中的实验动物福利和伦理

4.1 Nature论文险被撤稿,你的动物实验合乎动物福利和伦理吗?

4.2 实验动物的基本福利与伦理概述

5. 小鼠命名规则

5.1 常见小鼠命名规则

5.2 基因工程鼠命名规则(上)——定点突变小鼠

5.3 基因工程鼠命名规则(下)——转基因小鼠

6. 代谢综合征动物模型

6.1 糖尿病动物模型综述

6.2 1型糖尿病动物模型介绍

6.3 2型糖尿病动物模型介绍

6.4 肝损伤动物模型介绍

 

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