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材料准备:PAGE胶的配制
◆ 凝胶配制
◆ 加入凝胶
孵育电泳
◆ 添加体系
◆ 样品孵育
EMSA注意事项:
◆ 核酸探针避光存放
◆ 蛋白样品低温存放
◆ 样品孵育充分混匀
◆ PAGE凝胶预电泳
EMSA实验优点:
◆ 简单快捷:相较于CHIP和RIP,EMSA具有更简单的操作步骤,更短的实验周期,约一天内可完成。
◆ 结果可靠:EMSA实验能较真实的模拟蛋白质与核酸在体内互作的机制与过程。数据重复性好。
EMSA实验缺点:
◆ 通量低:EMSA一次实验仅能验证少数的核酸序列信息,通量低。CHIP和RIP实验通过目标蛋白分离以及高通量测序,可以得到海量的互作核酸序列信息。