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FlowJo 是美国斯坦福大学 Leonard Herzenberg 实验室研发的一款流式数据分析软件,它可以对所有流式细胞仪产生的数据进行分析,在多种电脑操作系统上兼容性良好。

由于功能强大,简单易用,已经被生命科学领域内的科学家、实验室广泛使用;同时 FlowJo 也是各高影响力核心期刊最受欢迎的流式数据分析软件。


Flowjo 破解版链接:
链接:https://pan.baidu.com/s/1LFfPwoadOAQF1HrDpDAhhw
提取码:37kz

安装说明:

1. 安装Flowjo-win64-10.3.0。
2. 管理员权限运行b-fj103x64.exe,指定flowjo的安装位置,打上破解补丁。
3. 取一U盘,大小不限,将license.key放入U盘根目录。
4. 运行flowjo,点击右下角license按钮,选择Use a hardware-based license(dongle)并点击OK。
5. 等待片刻,界面上的Unlicensed copy变为Drag samples here,即破解完成。以后运行时必须将此U盘插上。



本文主要针对流式分析中常用的平均荧光强度 (MFI),五个小步骤带你快速分析出 MFI。

01

打开 FloJo,显示工作台。

02

找到原始数据(fcs 格式文件)

Ctrl+A 将所有文件全选,鼠标将其直接拖到 All Samples 中,如图:

03

针对数据一进行分析

1、鼠标左键点击 fcs 格式数据出现流式散点图,X 轴默认选择 SSC(侧向散射,其散射强度与细胞内颗粒结构的质量正相关,即细胞内颗粒结构越复杂,质量越大,SSC 越大;反之越小)。

Y 轴默认选择 FSC(前向散射,该值与细胞的直径正相关,即细胞越大,FSC 越大;反之越小)。

2、圈门:根据实验目的选择合适的圈门工具(矩形门、十字门、椭圆门、多边形门)进行圈门,圈出需要进行分析的细胞后点 OK 确认。圈出的细胞默认为 Lymphocytes(当然也可以根据自己的需要重命名),下方的比例代表这群细胞占总细胞的百分比。

3、对圈出细胞进行分析,双击 Lymphocytes 选中这群细胞,根据实验目的、染料所需的荧光激发 / 发射波长选择合适的横纵坐标,完成后关闭处理界面回到软件主界面。

我选取的横坐标是 PE-A,纵坐标是 Histogram,点击横坐标边上的 T 可将横坐标数值改为 log 值,将其变为正值,得到下图。

4、添加 MFI:选择横坐标下方的Σ Statistion,点击下面的Σ+ 打开新界面,单击左边框的 Mean,选择想要分析的 PE-A,点击 Add 添加可以使其 MFI 在Σ Statistion 框中显示。

04

对其他数据进行批处理中

鼠标拖拽已处理文件到 All Samples 中,即可实现对其他数据的批量处理,简单高效。

05

数据导出

点 File 下方的 Save As 可导出到 Excel 表格,通过筛选等命令对数据快速处理,十分方便。

以上是本人对流式分析中常用到的 MFI 处理所了解的基本操作,希望对大家有所帮助。

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